本發(fā)明公開一種基于pH響應(yīng)階段添加糖化酶發(fā)酵生產(chǎn)檸檬酸的方法，包括將淀粉質(zhì)原料進(jìn)行調(diào)漿、液化、接種發(fā)酵，制得終發(fā)酵液，還包括在發(fā)酵培養(yǎng)過(guò)程中，當(dāng)發(fā)酵液pH降至2.0~3.0時(shí)，向其中分階段等量添加糖化酶的步驟，所述分階段等量添加為每間隔2~8h等量添加，所述糖化酶的添加總量為40~1000U/g殘余非葡萄糖量。本發(fā)明方法能解決檸檬酸發(fā)酵中后期糖化酶活力損失的問題，有效縮短發(fā)酵周期，提高發(fā)酵轉(zhuǎn)化率，降低終發(fā)酵液殘?zhí)橇?，降低廢水排放，同時(shí)能夠抵消自身分泌的葡萄糖糖苷酶活性，減少非發(fā)酵糖的產(chǎn)生，具有重要的經(jīng)濟(jì)效益與環(huán)境效益。