本專利涉及一種EV71單鏈DNA適配體及利用雙適配體檢測(cè)腸道病毒71型的化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑盒。所述適配體是序列如SEQ?ID?NO.1的適配體V11、序列如SEQ?ID?NO.2適配體V21，以及序列如SEQ?ID?NO.3適配體V7。本發(fā)明試劑盒，是以適配體V21為捕獲探針，以適配體V11為信號(hào)探針。具體包括：捕獲探針偶聯(lián)的免疫磁珠、分析緩沖液、信號(hào)探針偶聯(lián)的酶結(jié)合物、SA?HRP溶液、發(fā)光底物液。本試劑盒對(duì)EV71的檢測(cè)有高度的特異性；能從疑似手足口病患者的腦脊液、皰疹液、咽拭子和肛拭子等標(biāo)本中定性檢測(cè)EV71；利用本發(fā)明試劑盒檢測(cè)操作簡(jiǎn)單快速，檢測(cè)過(guò)程僅需45分鐘左右。