本發(fā)明涉及一種適合嗜熱鏈球菌培養(yǎng)及游離胞外多糖測定的化學成分確定培養(yǎng)基及其制備方法，所述培養(yǎng)基包括1種碳水化合物、9~20種游離氨基酸、6種維生素、6種無機鹽及3種有機鹽、去離子水；本發(fā)明公開了一種適合嗜熱鏈球菌快速生長且能提升其游離胞外多糖產(chǎn)量的化學成分確定的培養(yǎng)基配方，還公開了上述培養(yǎng)基在篩選產(chǎn)游離胞外多糖嗜熱鏈球菌中的應用。本發(fā)明設計的培養(yǎng)基能嗜熱鏈球菌游離胞外多糖產(chǎn)量，且對產(chǎn)游離胞外多糖嗜熱鏈球菌具有優(yōu)良的區(qū)分度，分離步驟簡便，得到的游離胞外多糖純度高。