本發(fā)明公開了一種熱調(diào)控電化學發(fā)光單細胞顯微成像裝置及成像方法，所述成像裝置包括電化學反應池，置于電化學反應池下方用于調(diào)節(jié)電化學反應池中工作電極溫度的加熱板，以及位于電化學反應池上方用于拍攝待測單細胞的電化學發(fā)光顯微鏡；電化學發(fā)光顯微鏡包括沿垂直軸線從下到上依次布置的物鏡、成像透鏡以及電子倍增相機。本發(fā)明將待測單細胞貼壁修飾在ITO玻璃電極上，通過加熱板調(diào)節(jié)ITO玻璃電極的溫度，改變ITO表面電化學發(fā)光的強度和發(fā)光層的厚度，增強對電極表面貼壁細胞粘附區(qū)域ECL成像對比度，以及細胞不同高度的輪廓圖。本發(fā)明增強單細胞成像靈敏度且可觀察不同高度細胞輪廓，同時具有良好的可逆性，可對電極表面貼壁細胞成像效果可逆調(diào)控。