本發(fā)明公開了一種微生物轉(zhuǎn)化生產(chǎn)4?雄烯二酮的方法，主要包括以下步驟：步驟1、將甾醇進(jìn)行前置化學(xué)合成得到改性甾醇；步驟2、將所得改性甾醇作為底物進(jìn)行微生物發(fā)酵轉(zhuǎn)化；步驟3、將轉(zhuǎn)化產(chǎn)物進(jìn)行提取、純化，得到4?雄烯二酮。通過將甾醇先進(jìn)行前置化學(xué)合成得到改性甾醇，增大了底物甾醇在油相中的溶解度，從而大幅度增大了底物投料量，投料量可以大于50g/L，突破了現(xiàn)有技術(shù)中底物投料量的限制，經(jīng)發(fā)酵轉(zhuǎn)化后HPLC測(cè)定驗(yàn)證，終產(chǎn)物為4?雄烯二酮，發(fā)酵轉(zhuǎn)化率及提取收率均大于80％，終產(chǎn)物含量≥99％，遠(yuǎn)高于現(xiàn)有的生產(chǎn)技術(shù)水平，具有突出的技術(shù)效果。