本發(fā)明公開了一種非洲豬瘟病毒p72蛋白穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞系及其構(gòu)建方法，在將p72蛋白完成序列改造得到重組蛋白后，分別將其克隆至原核表達(dá)載體、真核表達(dá)載體，分別進(jìn)行原核表達(dá)、真核表達(dá)和；其中，在原核表達(dá)的過程中，能得到穩(wěn)定表達(dá)p72重組蛋白的大腸桿菌以及能得到純化后的p72重組蛋白；經(jīng)過真核表達(dá)后，能得到穩(wěn)定表達(dá)p72重組蛋白的CHO細(xì)胞株。利用本發(fā)明的構(gòu)建方法能在2個月內(nèi)篩選獲得表達(dá)非洲豬瘟病毒p72蛋白的CHO細(xì)胞株，并在沒有嘌呤霉素篩選壓力下，細(xì)胞系傳至20代，仍可檢測到外源重組蛋白，成功率為90％，具有試驗(yàn)周期短、成功率高和表達(dá)成本低的優(yōu)點(diǎn)。