本發(fā)明涉及免疫分析醫(yī)學領域,具體地,本發(fā)明提供了一種肝纖維化程度相關IV型膠原蛋白化學發(fā)光免疫分析定量測定試劑盒及其制備方法。根據(jù)本發(fā)明試劑盒包括:1)IV型膠原蛋白校準品;2)親和素包被的固相載體;3)IV型膠原蛋白的抗體酶標記物;4)生物素化的IV型膠原蛋白的抗體;5)化學發(fā)光底物;以及6)濃縮洗滌液。進一步,根據(jù)本發(fā)明制備上述試劑盒的方法包括以下步驟:1)以IV型膠原蛋白純品配制校準品;2)以親和素包被固相載體;3)以酶標記IV型膠原蛋白的抗體;4)使IV型膠原蛋白的抗體生物素化;5)配制化學發(fā)光底物;6)配制濃縮洗滌液;7)分裝上述校準品、標記物和化學發(fā)光底物和洗滌液;以及6)組裝為成品。本發(fā)明的試劑盒具有簡便、快速、靈敏、穩(wěn)定等優(yōu)點。