本發(fā)明屬于生物傳感技術(shù)領(lǐng)域，涉及多功能便攜式電化學(xué)檢測試紙條及其制備方法。本發(fā)明的電化學(xué)試紙條包括絕緣基底、至少一個設(shè)置在絕緣基底上的工作電極和一個參比電極、以及設(shè)置在工作電極和參比電極上的反應(yīng)區(qū)，其特征在于，所述參比電極設(shè)計為插入電化學(xué)試紙條檢測儀時與電化學(xué)試紙條檢測儀形成電回路的結(jié)構(gòu)，以使得電化學(xué)試紙條檢測儀響應(yīng)該電化學(xué)檢測試紙條的插入而開機。所述試紙條的制備方法包括在絕緣基底上設(shè)置工作電極和上述參比電極，并在電極上設(shè)置反應(yīng)區(qū)。用于電化學(xué)試紙條的接口包括分別接觸工作電極與參比電極的導(dǎo)電銅帶。本發(fā)明試紙條允許插條開機，在樣本充滿后測量以及排除樣本非特異性的干擾，具有結(jié)果準(zhǔn)確、測量精準(zhǔn)等優(yōu)點。