本發(fā)明公開了一種檢測氨芐青霉素的電化學(xué)生物傳感器及其制備方法，所述電化學(xué)生物傳感器，包括：電極，依次修飾在電極表面的納米金、探針DNA和適配體DNA；所述探針DNA的序列如SEQ?ID?NO.1所示；所述適配體DNA的序列如SEQ?ID?NO.2所示。本發(fā)明利用納米金良好的生物兼容性和導(dǎo)電性，實現(xiàn)光電信號的擴增，提高氨芐青霉素的檢測靈敏度。本發(fā)明的檢測方法簡單，實現(xiàn)了儀器小型化，且易于操作，僅對玻碳電極表面進行簡單的處理，即可實現(xiàn)對氨芐青霉素的檢測。