本發(fā)明公開了一種PBP-1A親和型β-內酰胺類抗生素電化學生物傳感器及其制備方法和應用，特點是玻碳電極表面采用石墨烯、青霉素G和nafion共同修飾，其制備方法包括裸電極的拋光與清洗及活化步驟；將石墨烯、青霉素G依次滴加于玻碳電極表面，混勻，置于37℃吹干再滴入nafion，自然晾干表面后，浸于5wt%牛血清蛋白中，置于烘箱37℃，30min，取出用PBS溶液沖洗后，得到表面修飾石墨烯-青霉素G-nafion的玻碳電極作為工作電極，將工作電極置于上述體系溶液，DPV法檢測，根據標準曲線確定待測樣品中β-內酰胺類抗生素的濃度，優(yōu)點是具有靈敏度高、檢測速度快、檢測限低且高效、廉價。