本發(fā)明涉及一種甲狀腺球蛋白的定量檢測(cè)試劑盒及其制備方法和檢測(cè)方法，其試劑盒包括第一試劑、第二試劑、磁分離試劑、化學(xué)發(fā)光底物、校準(zhǔn)品及質(zhì)控品；所述第一試劑為N?羥基琥珀酰亞胺生物素酯標(biāo)記的混合抗體溶液，所述混合抗體溶液包括抗甲狀腺球蛋白單克隆抗體和抗甲狀腺球蛋白多克隆抗體；所述第二試劑為堿性磷酸酶標(biāo)記的抗甲狀腺球蛋白單克隆抗體溶液。本發(fā)明的甲狀腺球蛋白的定量檢測(cè)試劑盒，其抗體試劑采用N?羥基琥珀酰亞胺生物素酯標(biāo)記的混合抗體溶液，混合抗體溶液包括抗甲狀腺球蛋白單克隆抗體和抗甲狀腺球蛋白多克隆抗體，多抗體之間的互補(bǔ)性大大提高臨床靈敏度以及線(xiàn)性范圍，該試劑盒靈敏度高、特異性強(qiáng)。