一種化學(xué)合成的豬圓環(huán)病毒Cap蛋白基因、其改造方法及應(yīng)用,包括PCV2ORF2基因序列的來(lái)源及改造、引物的設(shè)計(jì)與合成、PCV2?ORF2短片段DNA的合成、全長(zhǎng)基因的合成及合成后序列、表達(dá)載體的構(gòu)建和目的基因在畢赤酵母中的表達(dá)等步驟。本發(fā)明綜合參考了PTDS法和PAS法,使基因合成費(fèi)用降低,步驟簡(jiǎn)單(兩步PCR),錯(cuò)誤率低,合成周期短。在整個(gè)化學(xué)合成的過(guò)程中,運(yùn)用了高保真的Taq酶,使誤配的堿基序列能夠在合成過(guò)程中得以修正,從而最大限度的減少了錯(cuò)誤堿基的產(chǎn)生。將該基因克隆入酵母表達(dá)載體構(gòu)建重組表達(dá)質(zhì)粒,重組表達(dá)質(zhì)粒規(guī)模發(fā)酵后提取的表達(dá)產(chǎn)物,可作為檢測(cè)PCV2抗體的診斷抗原,也可制備亞單位疫苗或核酸疫苗。
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