一種用于化學發(fā)光免疫法的試劑盒及其制備方法和應用。該試劑盒包括包被有待測物的抗原或抗體的免疫磁珠復合物，以及偶聯(lián)有聚合物分子的二抗或第二抗體，所述聚合物分子上標記有多個光源基團。由于采用信號放大技術，將多個發(fā)光基團共價偶聯(lián)到聚合物分子上，再將聚合物分子共價偶聯(lián)到二抗或第二抗體上，使發(fā)光基團成倍增加，從而使發(fā)光強度成倍增強，可用于檢測含量極低的生物指標。