本發(fā)明涉及一種1, 5?脫水葡萄糖醇測定試劑及制備方法，屬于借助于測定材料的化學或物理性質來測試或分析材料技術領域。由R1試劑和R2試劑構成，所述的R1試劑是由4－氨基安替比林溶解于添加有葡萄糖激酶、丙酮酸激酶、磷酸烯醇式丙酮酸鹽、三磷酸腺苷、抗壞血酸氧化酶、2－N－嗎啉乙磺酸的純化水中所形成的溶液；所述的R2試劑是由N－（2－羥乙基）哌嗪－N’－2－乙烷磺酸溶解于添加有吡喃糖化酶、辣根過氧化物酶、3－羥－2，4，6三碘苯的純化水中所形成的溶液。將發(fā)明應用于1, 5?脫水葡萄糖醇的測定，具有快速靈敏、準確性好、特異性高、穩(wěn)定性好等優(yōu)點。