本發(fā)明提供一種甲胎蛋白異質(zhì)體3（AFP?L3）測(cè)定試劑盒，試劑盒含有試劑R1和試劑R2；試劑R1中含有以下成分：哌嗪?1,4?二乙磺酸(PIPES)緩沖液、NaCl、表面活性劑、助懸劑、防腐劑。試劑R2：哌嗪?1,4?二乙磺酸(PIPES)緩沖液、羊抗人AFP?L3抗體包被膠乳顆粒、羊抗人AFP?L3抗體包被磁性納米顆粒、助懸劑、穩(wěn)定劑、防腐劑。本發(fā)明同時(shí)提供了該試劑盒的制備方法和應(yīng)用，該試劑盒可以有效替代化學(xué)發(fā)光免疫分析儀試劑盒，是一種新型穩(wěn)定性強(qiáng)，靈敏度高，重復(fù)性好，成本低的液體試劑盒，便于項(xiàng)目在臨床的開展和應(yīng)用。