本發(fā)明公開了一種液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用對(duì)煙草中類黃酮物質(zhì)進(jìn)行分離鑒定的方法。將樣本研磨，干燥，按0.1ml/mg樣本的量加提取劑提取，離心，收集上清液，按0.5ml/ml、1ml/ml上清液的量加入水和氯仿離心，取上清液進(jìn)行分析。以153+、151-為特征離子進(jìn)行掃描，對(duì)結(jié)果提取母離子進(jìn)行二級(jí)質(zhì)譜掃描，得到的譜圖與譜庫對(duì)比確定化學(xué)結(jié)構(gòu)再與標(biāo)準(zhǔn)物進(jìn)行驗(yàn)證。以上述已鑒定物質(zhì)及楊梅素、二氫楊梅素、兒茶素/表兒茶素、黃豆苷元、黃豆黃素及甘草素/異甘草素的分子離子作為特征離子進(jìn)行掃描，將搜尋到的疑似糖基化類黃酮物質(zhì)的分子離子作為母離子進(jìn)行二級(jí)質(zhì)譜掃描，得到譜圖與譜庫對(duì)比確定化學(xué)結(jié)構(gòu)再與標(biāo)準(zhǔn)物進(jìn)行驗(yàn)證。所述方法靈敏準(zhǔn)確適用于微量甚至痕量類黃酮物質(zhì)的分析檢測(cè)。