本發(fā)明涉及材料分析化學(xué)和翻譯后修飾蛋白組學(xué)等領(lǐng)域。本發(fā)明提供一種富集分離糖肽的方法，該方法是將響應(yīng)性聚合物糖肽富集與蛋白酶解物接觸，采用柱固相萃取模式或分散固相萃取模式分離富集糖肽，并對樣品進行質(zhì)譜分析，所述響應(yīng)性聚合物響應(yīng)性聚合物糖肽富集材料是利用表面引發(fā)?原子轉(zhuǎn)移自由基聚合反應(yīng)機制，將異丙基丙烯酰胺和硫脲衍生物在基底材料表面經(jīng)過共聚所得，所述基底材料的粒徑是0.2?50μm,孔徑為該方法通過對富集過程pH，溫度，有機相濃度等條件的控制，實現(xiàn)了復(fù)雜混合物(高非糖肽摻入比)中糖肽高選擇性、高重復(fù)性和高通量富集，顯著提高了糖蛋白中糖基化位點的鑒定數(shù)目。