本發(fā)明提供了一種東北鐵線蓮三萜皂苷對照品的制備方法,包括如下步驟:(1)東北鐵線蓮的藥材提取;(2)大孔吸附樹脂柱色譜分離;(3)制備高效液相色譜分離得3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-β-D-吡喃核糖基-(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖基齊墩果酸28-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷對照品。高效液相色譜-蒸發(fā)光檢測器純度檢查,不同色譜柱和流動相測定結(jié)果表明均為一個主色譜峰,改變色譜柱和流動相測定均未出現(xiàn)異常峰;以HPLC-ELSD峰面積歸一化法和不加校正因子的主成分自身對照法測定質(zhì)量分?jǐn)?shù)大于98%,符合含量測定用中藥化學(xué)對照品的要求。而且本發(fā)明方法藥材提取完全,產(chǎn)率高;有機(jī)溶劑用量少,成本低。