本發(fā)明涉及一種單克隆抗體、其制備方法及應(yīng)用,屬于免疫化學(xué)技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明采用混合酸酐法將萊克多巴胺和載體蛋白BSA、HSA及OVA偶聯(lián),合成人工免疫原RAC-BSA,RAC-HSA和包被原RAC-OVA;用合成的人工免疫原RAC-BSA,RAC-HSA免疫Balb/c鼠,取免疫鼠脾細(xì)胞和SP2/0骨髓瘤細(xì)胞融合,用包被原RAC-OVA包被,建立間接ELISA法和間接競爭ELISA法篩選出能穩(wěn)定分泌特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞株(5D8)。用獲得的細(xì)胞株免疫Balb/c鼠制備腹水,用辛酸-硫酸銨法和離子交換法純化腹水,純化后的抗體效價(jià)達(dá)到5.12×105以上。該單克隆抗體特異性強(qiáng),應(yīng)用于制備萊克多巴胺殘留檢測試劑盒和膠體金試紙條,可靈敏快速地檢測萊克多巴胺殘留。