一種高效表達與制備外分泌型人源AFP的方法，該方法主要包括如下三個方面的內(nèi)容：(1)利用基因合成技術合成AFP的DNA序列，再采用基因克隆和分子生物學方法構建酵母重組表達質(zhì)粒PpICZ?α?A-AFP，并進行質(zhì)粒抽提；(2)使用畢赤酵母表達系統(tǒng)體外誘導表達分泌型AFP重組蛋白，并通過優(yōu)化表達時間、誘導劑添加量等條件得出最佳誘導條件；(3)優(yōu)化硫酸銨分級沉淀,從發(fā)酵液上清中分離純化得到分泌到胞外的AFP重組蛋白，在55％硫酸銨濃度下目的蛋白AFP幾乎全部析出，且純度高達98.844％；本發(fā)明將純化得到的分泌重組蛋白AFP用臨床檢測電化學發(fā)光法檢測其生物活性，其值達3500ng/mL。