一種用于識別半胱氨酸的特異性熒光探針及其應用，其屬于精細化工領(lǐng)域。這種熒光探針為4位含有不同取代基團的7-羥基香豆素衍生物；按比例將4-取代基香豆素與三乙胺混合，再滴加丙烯酰氯酰氯，最后采用硅膠色譜法進行純化，得熒光探針。該熒光探針及相應半胱氨酸含量檢測過程不會受生物體系基質(zhì)及雜質(zhì)的干擾，可用于各種生物體系中半胱氨酸含量的定量測定。這種應該探針具有高特異性，可以與半胱氨酸特異性環(huán)化后水解，即7位酯鍵斷裂的水解產(chǎn)物；廉價易得，可經(jīng)化學合成獲得，合成工藝簡單易行；靈敏度高，具有具有良好的熒光發(fā)射光譜特性（400～500nm），通過繪制標準曲線進行半胱氨酸定量測定。