本發(fā)明公開了一種具有非對稱半花菁結構的新型熒光探針及其制備方法和應用，所述具有非對稱半花菁結構的新型熒光探針，其結構式如下：，本發(fā)明基于半花菁和取代苯胺結構，設計了一種具有半花菁?4?二甲胺基苯結構的新型熒光化合物，并利用簡捷、高效的化學方法實現(xiàn)了化合物的制備。本發(fā)明所設計化合物是一種具有新穎結構的近紅外熒光探針。該化合物具有良好的水溶性，以475?nm為激發(fā)波長，僅有Cys使探針在549?nm處的熒光發(fā)射增強（熒光強度增加約78倍），而在同樣條件下，分別加入Hcy和GSH時，探針在547?nm處幾乎沒有熒光發(fā)射。該化合物可作為一種新型選擇性檢測Cys的熒光探針。