本發(fā)明提供一種新冠病毒重組融合蛋白、其制備方法和應用。本發(fā)明通過對新冠病毒S和N重組融合蛋白的基因序列進行設計，選擇最優(yōu)的片段進行整合，再通過人源HEK293細胞系統(tǒng)重組表達融合蛋白，經(jīng)過純化后對融合蛋白的分子量、純度進行檢測，最后利用融合蛋白制成新冠病毒抗體膠體金檢測試紙條/試劑盒。與單獨使用S蛋白或N蛋白制備的膠體金檢測試紙條相比，該重組融合蛋白制備的膠體金檢測試紙條具有更高的靈敏度和更低的漏檢率。此外，本發(fā)明提供的新冠病毒重組融合蛋白可廣泛應用于不同平臺技術(shù)的新冠抗體檢測試劑盒開發(fā)，如膠體金、熒光免疫層析、化學發(fā)光和酶聯(lián)免疫等。