一種鑒定半滑舌鰨精液來源外泌體的ELISA方法，屬于魚類生物技術(shù)領(lǐng)域，特別是海水魚精液外泌體檢測應(yīng)用領(lǐng)域。本發(fā)明開發(fā)了針對半滑舌鰨精液來源的外泌體鑒定的方法，用以解決半滑舌鰨精液中外泌體鑒定的問題。本發(fā)明利用抗HSP90特異性抗體建立并優(yōu)化了一種直接法ELISA體系，通過檢測外泌體標(biāo)志蛋白HSP90，來間接體現(xiàn)外泌體的存在與否，其檢測結(jié)果特異性強(qiáng)，且操作簡便、快捷，且無需大型儀器設(shè)備及昂貴的化學(xué)試劑，具有應(yīng)用推廣價(jià)值。