本發(fā)明提供了一種比率型一氧化碳熒光探針及其制備方法和應(yīng)用，涉及生物化學(xué)材料領(lǐng)域。本發(fā)明提供的比率型一氧化碳熒光探針具有式I所示結(jié)構(gòu)，該比率型一氧化碳熒光探針具有合成原料易得，合成簡(jiǎn)單，目標(biāo)化合物熒光量子產(chǎn)率高，抗光漂白能力強(qiáng)及比率型響應(yīng)等優(yōu)點(diǎn)，避免了傳統(tǒng)熒光探針不宜在高濃度下檢測(cè)及單一發(fā)射在檢測(cè)過程中易受濃度、溫度、pH值及儀器等外界因素干擾的缺點(diǎn)，并且能夠用于檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)一氧化碳。