本發(fā)明公開了一種基于環(huán)糊精的智能響應(yīng)手性色譜填料及其制備方法和應(yīng)用，通過在硅球表面鍵合溫敏材料N?異丙基丙烯酰胺和手性拆分劑β?環(huán)糊精得到一種基于環(huán)糊精的智能響應(yīng)手性色譜填料。本發(fā)明制備的填料既具備硅膠填料的高機械強度、好的物理和化學性能等優(yōu)異的物化結(jié)構(gòu)，同時將制備的填料作為高效液相色譜柱的固定相時，還具有手性拆分能力和反相模式分離效果，具有親疏水性質(zhì)可切換、分離速度快、分離選擇性高等優(yōu)點，能夠彌補傳統(tǒng)手性固定相在復(fù)雜手性樣品分析中的不足，提高分離效率與分離速度。