公開了一種用于構(gòu)建條形碼化的單鏈DNA文庫的方法和試劑盒。該方法包括制備單鏈DNA分子，它們每一個具有去磷酸化的5’末端；將第一銜接子連接至每個單鏈DNA分子的3’末端；以及合成連接至第一銜接子的第一鏈的每個單鏈DNA分子的互補鏈。該試劑盒包括具有第一鏈的第一銜接子，其從5’末端到3’末端包括磷酸基團、條形碼序列和第一引物識別序列。該試劑盒還包括DNA連接酶，其用于在第一銜接子的第一鏈的5’末端與每個單鏈DNA分子之間進行連接，以及第一引物，其用于合成互補鏈的。該方法使得能夠和從低質(zhì)量和低數(shù)量的核酸樣品中分析稀有突變。