本發(fā)明涉及使用標記的底物或底物類似物測定靶的改進方法,所述方法包括在酶-催化的反應(yīng)中使所述底物或底物類似物進行反應(yīng),僅當?shù)孜锘虻孜镱愃莆锓磻?yīng)時,產(chǎn)生帶有獨立地可測定信號的標記部分。本發(fā)明特別公開了測定樣品中核酸的方法,所述方法基于使用末端-磷酸根-標記的核苷酸作為核酸聚合酶的底物。本發(fā)明方法使用核苷多磷酸酯、二脫氧核苷多磷酸酯或脫氧核苷多磷酸酯類似物,它們具有連接于末端磷酸根上的生色染料、化學發(fā)光或熒光部分、質(zhì)量標記或電化學標記。當核酸聚合酶使用這些類似物作為底物時,酶-活化的標記將存在于磷?;D(zhuǎn)移的無機多磷酸酯副產(chǎn)品中,磷?;D(zhuǎn)移的多磷酸酯產(chǎn)品通過磷酸酯酶的斷裂導(dǎo)致其上連接的標記中的可測定變化,當聚合酶試驗在磷酸酯酶存在下進行時,提供了實時監(jiān)測RNA或DNA合成和測定靶核酸的方便的方法。
聲明:
“末端磷酸根標記的核苷酸和使用方法” 該技術(shù)專利(論文)所有權(quán)利歸屬于技術(shù)(論文)所有人。僅供學習研究,如用于商業(yè)用途,請聯(lián)系該技術(shù)所有人。
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