本公開提供的光纖生物傳感探頭及其制備方法，所述光纖生物傳感探頭包括：傳導(dǎo)光纖；位于所述傳導(dǎo)光纖端部或端部附近的可表達(dá)熒光指示蛋白的感應(yīng)細(xì)胞，且所述感應(yīng)細(xì)胞分散于基于水凝膠的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境中；和與所述傳導(dǎo)光纖連接的空間環(huán)境，用于為所述感應(yīng)細(xì)胞提供保護(hù)。所述制備方法包括：通過細(xì)胞轉(zhuǎn)染制作可表達(dá)目標(biāo)熒光指示蛋白的感應(yīng)細(xì)胞；將所述感應(yīng)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至基于水凝膠的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境中，獲得含有感應(yīng)細(xì)胞的水凝膠；將所述傳導(dǎo)光纖裝配至所述空間環(huán)境，將所述含有感應(yīng)細(xì)胞的水凝膠轉(zhuǎn)移至所述空間環(huán)境中所述傳導(dǎo)光纖端部或端部附近，待水凝膠凝固后，獲得所述光纖生物傳感探頭。本公開提供的光纖生物傳感探頭可實(shí)現(xiàn)高化學(xué)特異性的實(shí)時(shí)監(jiān)測。