本發(fā)明提供了一種單細胞分離器的應(yīng)用方法。所述單細胞分離器包括探針板和細胞培養(yǎng)板，所述探針板上設(shè)置有探針，所述細胞培養(yǎng)板上設(shè)置有與所述探針相對應(yīng)的收容孔。所述單細胞分離器的應(yīng)用方法主要包括以下步驟：S1、對探針進行預(yù)處理；S2、準備細胞懸浮液；S3、將所述細胞懸浮液加入至所述細胞培養(yǎng)板的所述收容孔內(nèi)；S4、將所述探針伸入對應(yīng)的所述收容孔中；S5、將所述探針移出，以將單細胞從所述細胞懸浮液中分離出來。本發(fā)明單細胞分離器的應(yīng)用方法不僅簡單、易操作，而且對細胞本身無損傷、有利于細胞的后續(xù)培養(yǎng)、擴增與檢測。