本發(fā)明公開了一種基于磁珠富集痰液樣本的結核分枝桿菌檢測方法及其專用試劑盒。本發(fā)明方法包括如下步驟：用堿性消化液對痰液樣本進行消化處理，使痰液樣本中的結核分枝桿菌富含負電荷，得到消化后痰液；用表面修飾有富含正電荷的脂類多聚化合物的磁珠富集消化后痰液中的結核分枝桿菌；采用膜過濾法檢測富集有結核分枝桿菌的溶液中的結核分枝桿菌。該方法利用結核分枝桿菌在堿性條件下富含負電荷的特性，富含正電荷的磁珠能在痰液消化的情況下吸附結核分枝桿菌，進而達到純化的效果。通過實驗證明：富集有結核分枝桿菌的洗脫液容易被濾膜過濾，有效避免發(fā)生堵膜導致的樣本失效情況，也達到了良好的富集效果，提高了結核分枝桿菌檢出率。