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人血漿DNA中RASSF1A基因甲基化定量檢測方法

1026   編輯:管理員   來源:中冶有色網(wǎng)  
2023-03-19 07:04:39
本發(fā)明涉及一種對人血漿DNA中RASSF1A基因甲基化的定量檢測方法。本發(fā)明取靜脈血后得血漿,制備血漿DNA標準曲線樣品,提取待測血漿DNA、標準品血漿DNA和健康人血漿DNA,對血漿DNA、標準品血漿DNA和健康人血漿DNA化學(xué)修飾,針對人RASSF1A基因啟動子區(qū)中565號CpG位點設(shè)計特異性引物和Taqman熒光探針熒光定量MSP擴增體系,以標準品血漿DNA的擴增結(jié)果制定外標準曲線,對待測樣本進行定量結(jié)果分析。解決了手術(shù)治療的腫瘤患者病程多數(shù)已經(jīng)處于中晚期,手術(shù)標本的獲取創(chuàng)傷性大,甲基化的檢出率也相對較低等缺陷。具有靈敏度高、最低檢出限是1.5×102拷貝/ml,檢測針對RASSF1A基因啟動子區(qū)中第565號CpG位點,特異性強、獲取容易、創(chuàng)傷性小,能夠定量檢測血漿DNA中RASSF1A基因甲基化。
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