本發(fā)明屬分析化學技術(shù)領(lǐng)域,具體為一種糖苷內(nèi)切酶催化同位素標記N-糖鏈的方法。本發(fā)明采用在18O水中進行糖苷內(nèi)切酶酶解糖蛋白的反應,在N-糖鏈被酶切下的同時,在其還原末端標記上一個同位素18O分子;質(zhì)譜檢測結(jié)果證明,同位素18O標記的糖鏈分子量和不標記的糖鏈分子量之間相差2道爾頓,同位素18O分子被穩(wěn)定地標記于糖鏈還原末端。本發(fā)明簡單、高效,彌補了糖鏈同位素18O標記技術(shù)的空白,可以有效地用于糖鏈相對定量。